先将菌种瓶在0.2%的高锰酸钾水溶液里洗一遍,表面消毒后再用,将菌种瓶打碎,种块放入干净的盆中,用手掰碎,取三分之二的菌种,往料面上撒一遍,再用叉或手抓提培养料,让菌块落入料层中,整平料面,再将余下的三分之一菌种均匀地撒在料表面,最后用木板或盆底稍压平料面,紧跟覆盖土壤。
.接种、培养 通过无菌操作方法将菌种接入试管斜面上,置28℃、3天后将温度降至24℃继续培养,7—15天左右,菌丝长满整个试管斜面,即成(生产)母种。(二)原种、制备 母种接种到原种培养基上,进行扩大繁殖育种即为原种,原种一般采用广口瓶或袋装。
栽培食用菌的方法主要有生料栽培、发酵料栽培和熟料栽培。所谓生料栽培,就是将培养料加水搅拌均匀后不再灭菌或发酵而直接接种,然后在适宜环境条件下发菌出菇。目前可以生料栽培的种类只有平菇、草菇和大球盖菇,其他种类都不能生料栽培。
孢子分离法,是用食用菌的有性孢子或无性孢子萌发成菌丝,培养成菌种的方法。这种菌种生活力较强,但孢子个体之间有差异,且自然分化现象较严重,变异大,需经出菇试验才能在生产上应用。 (l)单孢分离法:是每次或每支试管只取一个担孢子, 让它萌发成菌丝体来获得纯菌种的方法。
用于生产的菌种一般要经过三个步骤。母种(一级试管种)的培养扩凡——原种(二级广口瓶种)的生产——栽培种(三级菌袋种)的生产。母种的培养:从孢子分离或组织分离得到的纯菌种,在生产上叫母种。培养母种时,应根据不同食用菌菌丝所必须的生长条件选择合适的培养基,进行扩大培养。
其制作方法是按照不同菌种对水分要求的不同将麸皮与水以一定的比例1:(0.8~5)拌匀,装量为试管体积2/5,湿热灭菌后经冷却,接入新鲜培养的菌种,适温培养至孢子长成。将试管置于盛有氯化钙等干燥剂的干燥器中,于室温下干燥数日后移入低温下保藏;干燥后也可将试管用火焰熔封,再保藏,则效果更好。
代:首先配制改良马丁培养基,吸取0.5-0.8ml接至0代安瓿管内,轻轻混匀,将全部混悬液转到5-10ml的改良马丁培养基内,置23-28度培养5-7天,此为第一代。
食用菌试管菌种竖立着培养方法是竖面菌种试管内,注入一层已灭过菌的液体石蜡。注入量以高出斜面1厘米为宜,使菌种与空气隔绝。降低其新陈代谢的活动,置于22—25℃恒温箱培养。静待即可。
试管母种应该接入三角瓶培养基上,经过培养以后,再接入发酵罐。
等 压力表回零才能排气开锅,取出试管倾斜排放在桌面上,斜面试管有两种:原母种试管 --- 斜 面长度应为管长的 1/3 ,生产母种试管的斜 面应为管长的 1/2 ,冷却凝固后,取一些试管放入恒温箱中 27--30 度空白培养 10 天,经无菌观察,确认无杂菌,才能大量用于分离制种或转接生产母种。
蘑菇菌种培育方法有分离培养、接种培养、培养液体种。分离培养 这是通过将蘑菇菌种进行母种分离来实现的第一步培养步骤,一般来说,有孢子分离法、组织分离法以及基内菌丝分离等方式。
蘑菇菌种的培养方法:地沟覆土法:选地势平坦的场地,挖深30厘米、宽1米、长不限的畦床,床底略呈龟背状,床与床之间相隔80厘米以上,并留好排水沟。畦床先用1000倍敌敌畏喷洒杀虫,用5%石灰水消毒杀菌。将发好菌的菌袋塑料膜包去,把菌棒横卧于床内,菌棒间相隔2~3厘米,排满畦床。
建堆发酵:可以用无霉变的碎玉米、干牛粪、尿素等配制成蘑菇菌种的培养基质。 进行播种:将蘑菇菌种接种在基质上,并用塑料布包裹住培养基,注意培养基的中间要比边缘厚。 出菇管理:当菌丝长至距离表层一厘米时,及时喷水保湿。
常规接种培养,在25℃左右下培养35—45天,待菌丝走满即可用于生产。
分装时,一手捏松弹簧夹,使培养基流出,另一只手握住几支试管或锥形瓶,依次接取培养基。分装时,注意不要使培养基粘附管口或瓶口,以免浸湿棉塞引起杂菌污染。装入试管的培养基量,视试管和锥形瓶的大小及需要而定。
将灭菌过的培养皿放在火焰旁的桌面上,右手拿装有培养基的锥形瓶,左手拔出棉塞。右手拿锥形瓶,使瓶口迅速通过火焰;用左手将培养皿打开一条稍大于瓶口的缝隙,右手将锥形瓶中的培养基(约10~20ml)倒入培养皿,左手立即盖上培养皿的皿盖,轻轻摇匀。
分装试管-将煮好的培养基溶液,趁热分装于试管中,装量为试管长度的1/塞棉塞-棉塞长4-5厘米,塞入管口的长度为棉塞总长度的2/3,松紧要适中。打捆-将塞好棉塞的试管,每7-10支绑成一捆,顶端用牛皮纸包扎好。
⑤趁热分装:培养基的分装量应为试管长度的1/5或者1/4,不能过多或过少。操作时应尽量防止培养基沾在试管口上,若已粘上应用纱布或脱脂棉擦净。
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